产品介绍

 本品为绿色荧光标记的溶酶体探针，具有504/511nm的最大激发/发射波长。本品以溶于无水DMSO的1mM储存液形式提供。 

使用方法(仅供参考) 
使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。 
1.工作液的配制 
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度，推荐工作液浓度为50-75nM； 
【注意】：1）为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。2）若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。 
2.染色 
2 .1 对于贴壁细胞1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。 
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min～2h（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。 
【注意】：对Lysotracker Green DND-26内化过程的动力学研究表明，活细胞摄取此染料仅需数秒即可。缺点在于此探针可能引起溶酶体产生“碱性效应Alkalizing effect”，也就是说过长孵育时间会诱导溶酶体pH值提高。建议仅当该探针于37℃孵育细胞1-5min才可用作pH指示剂。 
3）利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。 
2.2 对于悬浮细胞 
1）离心，吸除上清。 
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30min～2h（具体时间需根据细胞类型而定）。 
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。 
4）置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。 
【注意】：对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。