产品介绍
Fluo-3 AM是一种常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针。 Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3游离配体几乎是非荧光性的,其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-3可以和钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光,最大激发波长为506 nm,最大发射波长为526 nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488 nm左右,发射波长为525-530 nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
本Fluo-3 AM(钙离子荧光探针)可以用无水DMSO(anhydrous DMSO)配制5mM的储存液。 用于细胞内钙离子检测时,Fluo-3 AM的常用浓度为0.5-5 μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM的适当溶液和细胞一起在20-37℃孵育15-60分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-3 AM在细胞内完全转变成Fluo-3。
注意事项
本Fluo-3 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。