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基 因 型rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIqlacZΔM15]简 要 说 明JM110菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR) ;是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株,提取得到的质粒DNA,可被对dam、dcm甲基化敏感的内切酶切割; lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选,但转化效率不高,High5TM系列JM110感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19 质粒检测转化效率约107 cfu/μg。一般不用于质粒构建,只适用于质粒转化。操 作 说 明1.JM110感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。注 意 事 项1. 感受态细胞最好在冰上融化。冰上放置大约5分钟即可融化,融化后不可久放,八分钟内加入质粒,否则会影响转化效率。2.混入质粒时应轻柔操作。3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
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- 储存条件: -80℃
- 用途: 克隆感受态细胞
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质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子摩尔量 (g/mol)