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- 介绍：
基 因 型Agrobacterium rhizogenes (carbR,strR,rifR ) pRi1193 (agropine type)简 要 说 明发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.1193发根农杆菌含有pRi1193农杆碱型Ri质粒，特别适合豆科，茄科植物毛状根的诱导，同时具有羧苄青霉素，链霉素，利福平抗性。生产的Ar.1193化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301质粒（卡那霉素抗性）检测，转化效率>104 cfu/μg DNA。操 作 说 明1.取-80℃保存的Ar.1193发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。2. 每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA（转化效率较高，第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量），用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀，依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。3. 冰浴中拿出放室温，加入700μl 无抗生素的TY液体培养基，于28℃振荡培养2小时。4. 6000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3 天注 意 事 项1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。2. 混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀，务必使质粒快速、均匀分散开，与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。3. 平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量或降低涂板的菌量。4. Ar.1193具有羧苄青霉素、链霉素、利福平抗性，不可用于具有羧苄、链霉素或利福平抗性质粒的转化。
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- 储存条件： -80℃
- 用途： 发根农杆菌感受态细胞
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质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子摩尔量 (g/mol)
