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S32875

ER2566 感受态细胞

国产
  • 英文名:
  • ER2566 Chemically Competent Cell
  • 别名:
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国产 S32875-100ul*10 ¥360.00元 预计交期:2-3天 0 0 0 EA 加入购物车
国产 S32875-100ul*50 ¥1530.00元 预计交期:2-3天 0 0 0 EA 加入购物车
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    基 因 型F- λ- fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm]简 要 说 明ER2566菌株是NEB公司开发的具有超高转化效率的蛋白表达原核菌株,来源于BL21。Lac启动子启动下游T7RNA聚合酶的表达,可用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。fhuA2赋予ER2566菌株对噬菌体T1的抗性。同时ER2566为lon 和 ompT蛋白酶缺陷菌株。Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效抑制表达的异源蛋白在大肠杆菌体内的降解,Δ(mcrC-mrr)114,mcr-73突变的存在使ER2566菌株无法对外源DNA进行标记、限制,提高了外源甲基化DNA的转化效率。High5TM系列ER2566感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达109 cfu/μg DNA。 操 作 说 明1.取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。注 意 事 项1. 感受态细胞最好在冰上融化。2.混入质粒时应轻柔操作。3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

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  • 储存条件: -80℃
  • 用途: 表达感受态细胞
  • 注意:部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,仅供客户参考交流研究之用。
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