一、简介
牛血清白蛋白,简称BSA,是一种来源于牛血清的球蛋白,在牛血清总蛋白中含量能达到60%。它是由一种单链多肽蛋白,包含了583个氨基酸残基,分子量约为66.4kD。
牛血清白蛋白外观为白色至类白色冻干粉末,易溶于水,难于盐析,等电点4.8。水溶液加热至60-70℃时,蛋白即凝固沉淀。
源叶产品线分为两种货号分别是:S12012、s25762。
二、制备方法
1、冷乙醇法:这是最早发明的分离BSA的方法,在1940年由哈佛大学的Cohn发明,所以又称之为“Cohn′s method”。 Cohn利用不同的温度和不同的乙醇浓度进行多步蒸馏分离,最后将血清分离成五个组份,其中第五组分含有最多的白蛋白,从而BSA又称之为“第五组份”。
2.热休克法:heat-shock热激是通过控制温度和过滤来分离白蛋白。因乙醇有易挥发和危险性,从而在几个关键步骤用热代替乙醇。热休克法生产的BSA
产量高,纯度也高,逐渐取代Cohn法成为BSA分馏主要方法,但热休克法中采用的加热,也使的BSA蛋白溶液变性,活性低。
3.色谱层析法(Chromatographic)法:是目前BSA生产最为先进的方法,也是最为温和的方法;主要包括三个步骤,超滤,离子交换色谱层析和硫酸铵沉淀;该方法先进,但与其他方法比成本较高。
三、应用
牛血清白蛋白资源丰富,容易制得,且价格低廉,在生化实验领域中有着相当广泛的应用。
1. 首先,BSA在牛血液中主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用,因而在动物细胞无血清培养中,添加BSA可起到生理和机械保护作用和载体作用。
2. BSA还是一种稳定剂和载体。在一些限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,添加BSA,能起到“保护”或“载体”的作用,不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶,加入BSA一般也不会受到什么影响。
3.在Western blot实验中,BSA溶液是一种最常用的封闭液。BSA可以与表面上的空白位置结合,同样以机械填补(堆积)和吸附覆盖的方式结合在膜上,通过“填补”和“覆盖”蛋白结合位点,以避免一抗的非特异结合,从而起到封闭的作用。
4.无脂肪酸BSA,一般用于脂肪代谢相关分析的载体蛋白,也可以与某种特异性的脂肪酸结合以形成白蛋白,可应用于增强细胞培养体系的性能。若实验室中脂肪或者脂肪酸的存在影响激素或者胆固醇的读书时,无脂肪酸BSA是首选产品。
5.近年来,在药物研究方面,也有了许多应用研究。很多学者通过药物与BSA的相互作用机制研究,来获得药物与血清白蛋白内部之前结构-活性关系的重要信息。