链亲和素

    生物技术级,17u/mg

Streptavidin

源叶
S12020
9013-20-1
MFCD00082035
链酶亲和素;链霉抗生物素蛋白;链霉亲和素
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源叶 S12020-1mg 生物技术级,17u/mg ¥380.00元 >10 3 - 5
源叶 S12020-5mg 生物技术级,17u/mg ¥1450.00元 >10 1 1 -
源叶 S12020-10mg 生物技术级,17u/mg ¥2600.00元 >10 2 2 2
源叶 S12020-50mg 生物技术级,17u/mg ¥7500.00元 10 - - -
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产品介绍

介绍:链亲和素(SA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)表达的一种小分子蛋白。本制品为127AA最佳核心结构,每分子SA结合4个生物素分子,国际比活性12~15U/mg。SA与禽类亲和素(Avidin,AV)相比特异性更强,与生物素结合后半衰期长达6h,而AV半衰期仅为1h。由于SA不含糖基且等电点接近中性,因此SA在检测应用中具有比AV更低的非特异性背景。 用途:本制品已广泛应用于制备SA-偶联酶制剂(如SA-HRP,SA-AP等),SA-偶联荧光素(即荧光染料,如SA-FITC,SA-Cy2,SA-Cy3等)、SA-偶联磁珠等,进而参与酶联免疫吸附检测(ELISA)、免疫组化、亲和色谱填料、含StrepTagII标签(8-AA寡肽)的蛋白纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究、生物芯片被料等生物技术领域。 优点:高亲和力,高偶联效率。 注意事项: 1.冻干粉溶解后应避免反复冻融,建议分装成小包装后分别冻存。 2.冻干粉中含20mMNa2CO3 pH9.5的缓冲体系,若用于包被,酶标可以直接使用。若用于胶体金,最好调节pH或透析后使用。溶解后立即使用效果最好,不能4℃长期存放。 3.若用于ELISA包板,胶体金烘金,硝酸纤维素膜上用SA划线后需要烘干保存,包被液或缓冲液中需加入20%蔗糖作为活性保护剂。 【操作步骤简述】 一、微孔板包被 1、用碳酸钠缓冲溶液(pH 9.6)溶解冻干粉,将浓度稀释成3-10ug/ml(客户可设定梯度进行实验) 注意:由于SA等电点是7.4,包被不建议使用中性缓冲液 2、用移液器吸取100ul/孔,4℃过夜包被或者37℃包被2h; 3、洗涤:倒尽板孔中液体,加200ul洗涤液,静放三分钟,反复三次,最后将反应板倒置在吸水纸上,使孔中洗涤液流尽,扣干 4、后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程 若不立即进入下游实验,包被板需要进行烘干保存时。包被前,将包被液中加入20%蔗糖作为活性保护剂。 二、SA偶联磁珠 2.1 NHS 活化 1、充分混匀磁珠后,取100μl PangoBeads COOH 磁珠到1.5 ml 离心管中,置于磁性分离上,待固液分离后去除上清液; 2、取200μl MES溶液(25mM,pH 5.0)加入到离心管中,置于磁性分离上,待固液分离后去除上清液。重复该步骤1 次; **3、迅速加入新配制的50μl EDC 溶液和50μl NHS 溶液 (均为50mg/ml, 以上述MES 配制)到装有磁珠的离心管中,漩涡混匀使磁珠充分悬浮,室温下垂直混合30min; **4、反应结束后,加入100μl 上述 MES 溶液洗涤 2 次;(活化状态不宜长时间保存, 建议立即进行偶联) 2.2 蛋白偶联 1、将离心管置于磁性上,分离去除上清液,加入100μl蛋白溶液(25 mM MES,pH 5.0) 轻柔地混匀;(蛋白浓度在0.1-2.0mg/ml) 2、在室温下垂直混合反应2h,或在4℃条件下垂直混合过夜; 3、反应结束后将离心管置于磁分离架上,磁性分离去除上清液,加入1ml乙醇胺溶液 (3M,pH9.0)洗涤磁珠 2 次; 4、加1ml乙醇胺溶液(3M, pH 9.0)于离心管中,涡旋30s,将离心管置于垂直混合 仪中室温反应1-2h; 5、反应结束后,将离心管置于磁力架上,待固液分离后移除上清液,然后加入100μl 纯化水轻柔涡旋 30s,磁吸分离,重复该步骤 1 次; 6、加入适量的保存液(可根据需要来确定保存溶液的加入量,以调整偶联配体磁珠的加入适量的保存液(可根据需要来确定保存溶液的加入量,以调整偶联配体磁珠的浓度)保存于4°,如果固定的生物配体稳定,可以在保存溶液中加入0.02%(W/V)叠氮化钠作为抑菌剂。
外观: 冻干粉
敏感性: 对热敏感,易吸潮
储存条件: -20℃
用途: Applications for enzyme-labeled (HRP, AP) streptavidin: Enzyme immunoassays (EIA), including enzyme-linked immunsorbent assays (ELISA) with biotinylated antibodies Cell and tissue staining (for light microscopy) Western blotting (WB) and other membra
注意: 部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,仅供客户参考交流研究之用。

参考文献(15篇)

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