- 介绍：
基 因 型endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F´ traD36 proAB laqI qZΔM15](DE3)简 要 说 明JM109(DE3)菌株来源于JM109，用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于JM109的染色体上，所以称为JM109(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。生物生产的JM109(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率高于108 cfu /μg DNA。操 作 说 明1. JM109(DE3) 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA并用手拨打EP管底混匀，冰中静置25分钟。2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或 LB培养基上。5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。注 意 事 项1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。3. 诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2 mM均可）。4. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
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- 储存条件： -80℃
- 用途： 表达感受态细胞
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本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子摩尔量 (g/mol)
