产品介绍
重组TEV蛋白酶(His标签)是烟草花叶病毒小核体蛋白a催化结构域基因编码的经高度纯化的制剂,该酶的生物学功能是在病毒产生过程中将多蛋白体酶解为单一蛋白。和因子Xa、凝血酶相比,TEV酶是识别序列更加严格。做为生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重要工具酶,TEV酶识别非常一致的7氨基酸序列:E-Xaa-Xaa-Y -Xaa-Q-P1’(G/S),酶切发生在Q和P1’之间的肽键。最常用的7氨基酸序列是ENLYFQG。P1’位置可以是不同的小分子氨基酸,这样目标蛋白从融合蛋白的N端释放,带自然的N末端或者只多一个氨基酸的蛋白。该产品是经过了基因工程改造的蛋白酶,稳定性好,在广泛的温度范围具有特异性。本品来源于重组大肠杆菌,经过高度纯化,比活性达到10,000U/mg。最适酶切温度是30℃,但在4℃也具有酶活性。rTEV-H带His标签,酶切后可方便地通过Ni亲和柱层析去除。酶切的条件比如:温度、pH、DTT等可根据具体蛋白进行优化。
纯 度: 经SDS-PAGE电泳分析,大于95%。
活性单位: 一个酶活性单位定义为在4℃,pH8.0条件下,12~16小时在酶切反应缓冲液中将5μg融合蛋白95%酶切所需要的酶量。
推荐酶切条件:
融合蛋白: 0.1mg
重组TEV蛋白酶: 20U
10x酶切缓冲液: 10μl
温度(℃): 4
总体积: 100μl
时间(小时): 12~16
10x 酶切缓冲液:
500 mM Tris-HCl, pH 8.0
5 mM EDTA
1% Tween-20 (v/v)
10 mM DTT
产品本身蛋白浓度较低,电泳基本无法检测到。