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随着秋冬时节来临，新型冠状病毒又掀起了一轮新的传播 11月11日0—24时，31个省（自治区、直辖市）和新疆生产建设兵团报告新增确诊病例98例。其中境外输入病例19例（上海6例，云南5例，黑龙江2例，广东2例，内蒙古1例，浙江1例，福建1例，广西1例）；本土病例79例（辽宁52例，均在大连市；河南12例，其中郑州市6例、周口市6例；北京6例，其中海淀区4例、朝阳区2例；黑龙江5例，均在黑河市；河北2例，均在辛集市；江西1例，在上饶市；云南1例，在德宏傣族景颇族自治州），含16例由无症状感染者转为确诊病例（河南11例，辽宁5例）。 新型冠状病毒肺炎（Corona Virus Disease 2019，2019-nCoV），简称“新冠肺炎”目前，对全球公共卫生安全构成了巨大威胁!

什么是病毒？ 病毒(virus): 是由一个核酸分子(DNA或RNA)与蛋白质构成的非细胞形态，靠寄生生活的介于生命体及非生命体之间的有机物种，它既不是生物亦不是非生物，目前不把它归于五界(原核生物、原生生物、真菌、植物和动物)之中。病毒可以感染几乎所有具有细胞结构的生命体。一个保护性外壳包裹的一段DNA或者RNA，借由感染的机制，这些简单的有机体可以利用宿主的细胞系统进行自我复制，但无法独立生长和复制 。 冠状病毒在系统分类上属套式病毒目（Nidovirales）冠状病毒科（Coronaviridae）冠状病毒属（Coronavirus）。冠状病毒属的病毒是具囊膜（envelope）、基因组为线性单股正链的RNA病毒，是自然界广泛存在的一大类病毒。2019新型冠状病毒（SARS-CoV-2 [3] ，引发新型冠状病毒肺炎COVID-19 [4] ）是目前已知的第7种可以感染人的冠状病毒，其遗传物质为RNA； RNA和RNA之间重组率非常高，病毒出现变异正是由于这种高重组率。

检测原理 核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸，来确定是否被新冠病毒感染。因此一旦检测为核酸“阳性”，即可证明患者体内有病毒存在。新冠病毒感染人体之后，首先会在呼吸道系统中进行繁殖，因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断人体是否感染病毒。所以说，核酸检测阳性可以作为新型冠状病毒感染确诊的金标准。 核酸检测（ RT -PCR荧光法）是当前检测“新冠肺炎” 的主要方法，其基本原理是：根据病毒的核酸序列设计特异性的引物用于扩增对应的核酸片段，同时高度特异性的TaqMan探针可与对应的核酸片段进行结合，并在Taq酶外切酶活性作用下发生水解，产生荧光信号，根据荧光信号与扩增循环数之间的关系可得到实时扩增曲线。标本处理前必须进行56°C 30min病毒灭活预处理，方可进行后续处理。目前各大商业公司试剂盒中以2019-nCoV的RdRP基因(位于ORF 1ab读码框)、E基因和N基因为检测对象，从而实现对2019-nCoV核酸的检测。

核酸诊断检测，首先要进行样本采集，病毒采样管是检测流程中最重要的环节之一。病毒采样管的及时供应，也是疫情防控的重要保障。病毒采样管最主要由拭子+采样管+病毒保存液组成。

检测步骤

病毒保存液一方面直接裂解病毒释放核酸，消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解，另外一方面，又能让病毒的蛋白变性，失去活性而“死掉”，不再有传染性，提高运输和检测阶段的安全性。

广泛使用的病毒保存液有两种，一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液，另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。 病毒保存液中，用量最大的成分是胍盐，核酸提取是指利用物理、化学等方法将核酸从样品中分离出来的过程。分离得到高质量的核酸是分子生物学研究的关键步骤。盐酸胍、异硫氰酸胍和蛋白酶K都具有使蛋白质变性的作用，在核酸提取中有广泛的应用。

盐酸胍，CAS号：50-01-1，是一种白色结晶粉末。盐酸胍是核酸酶的强抑制剂，但并不是强变性剂，它在核酸提取中的主要作用是使蛋白质变性并抑制酶活性。盐酸胍能够快速破坏细胞膜，使得蛋白质变性沉淀，从而让核酸能够摆脱蛋白质的缠绕。盐酸胍的溶解能力和变性能力相对较强，但在酸性条件下易产生沉淀、可能对蛋白质离子交换色谱有干扰等缺点。

异硫氰酸胍，CAS号：593-84-0，是一种白色结晶性粉末。异硫氰酸胍是一类强力的蛋白质变性剂，无RNA酶和DNA酶活性。在核酸提取中，异硫氰酸胍能够迅速破碎细胞或病毒释放核酸，抑制细胞释放出的核酸酶，保证核酸一级结构的完整性。新型冠状病毒是一种RNA病毒，各种RNA病毒的核酸由于自体降解和生物酶介导的降解，是较难稳定保存的生物分子。而异硫氰酸胍是一类强有力的蛋白质变性剂，且具有无RNA酶和DNA酶活性的特点。采样管中加入异硫氰酸胍能够破坏RNA酶的分子结构，使样本中可能存在的核酸酶失活，起到稳定保存病毒样本的作用。作为核酸裂解液的主要成分，异硫氰酸胍能迅速破碎病毒，使核蛋白与核酸迅速分离，同时抑制释放出的核酸酶活性，保证核酸一级结构的完整性，提高核酸提取效率；

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